🔶تهیه DNA باکتریوفاژ🧬
تفاوت اصلی تخلیص DNA فاژ و تهیه DNA پلاسمید، در این است که تخلیص DNA فاژ نیازی به لیز سلولی ندارد چون در بیشتر موارد فاژ برای تکثیر، باکتری را لیز میکند و از آن خارج میشود. که به همین دلیل به میزان زیادی باکتریوفاژ در محیط خارج سلولی کشت باکتری آلوده وجود دارد. در این محیط با دور مناسب سانتریفیوژ، باکتریهای سالم و تخریب شده رسوب کرده و ذرات فاژ معلق باقی میمانند.
سپس ذرات فاژ جمعآوری شده و برای استخراج DNA، کپسید فاژ و پروتئینهای محلول از باکتری حذف میشود.
مجموع این فرآیندها سادهتر از تهیهی DNA پلاسمیدی یا تام سلولی است. یکی از مشکلات تخلیص DNA فاژ به ویژه در مورد فاژ λ، رشد آن در محیط کشت آلوده است تا فاژهای خارج سلولی به اندازه کافی زیاد شود. میزان حداکثر مورد انتظار جهت فاژ λ 10¹⁰ ذره در هر میلی لیتر است. از این تعداد فقط 500ng از DNA بدست میآید. به همین دلیل برای بدست آوردن مقدار کافی از λ DNA حجم بیشتری از محیط کشت لازم است که هزینههاب تولید را زیاد میکند.
کتاب کلون سازی ژن و آنالیز DNA : تی- اِ - براون ویراست هفتم پارت نوزدهم
گردآوری توسط کسری راستی
#براون #DNA #انستیتو_سنسوم #کسری_راستی
آیدی کانال:
https://t.center/BiologyWithK_R