🔶تخلیص DNA فاژ M13 مشکلات کمی دارد🧬 تفاوت بین چرخه آلودگی λ و M13، شکل دو رشته تکثیر شونده M13 است که مانند یک پلاسمید عمل می‌کند و با روش‌های استاندارد تهیه پلاسمید به راحتی تخلیص می‌شود. از سلول‌های آلوده شده با M13 عصاره سلولی تهیه شده و با استفاده از سانتریفیوژ، فاژ تکثیر و DNA آن جدا می‌گردد. شکل تک رشته‌ای M13 بیشتر مورد نیاز است و مزیت آن نسبت به فاژ λ این است که میزان زیاد از M13 آسانتر بدست می‌آید. سلول‌های آلوده به طور مداوم ذرات فاژ M13 را به محیط ترشح کرده و با رشد سلول‌های آلوده، میزان فراوانی از M13 بدست می‌آید. علاوه بر این با توجه به اینکه باکتری‌ها تخریب نمی‌شوند، آلودگی با بقایای سلولی وجود ندارد؛ در نتیجه سانتریفیوژی که برای تهیه فاژ λ لازم است، به ندرت برای M13 لازم می‌باشد. به طور خلاصه، تهیه DNA تک رشته M13 مستلزم حجم کمی از کشت آلوده، سانتریفیوژ کردن جهت رسوبدهی باکتری‌ها، استخراج با فنل جهت حذف پوشش پروتئینی و رسوبدهی با اتانول برای تغلیظ DNA می‌باشد. کتاب کلون سازی ژن و آنالیز DNA : تی- اِ - براون ویراست هفتم         پارت بیستم گردآوری توسط کسری راستی #براون #DNA #انستیتو_سنسوم  #کسری_راستی آیدی کانال: https://t.center/BiologyWithK_R