🔶تهیه DNA پلاسمید🧬   یکی از روش‌های جداسازی پلاسمید، جدا کردن بر اساس اندازه است.   اگر سلول را لیز کنیم، مقدار کمی از DNA شکسته می‌شود و هنوز قطعات بدست آمده بزرگتر از پلاسميد هستند که می‌توان با سانتریفیوژ آن‌ها را با بقایای سلولی جدا کرد. علت آن، اتصال کروموزوم‌های باکتری به غشا است که اگر این اتصال شکسته نشود، کروموزوم همراه با بقایای سلولی رسوب می‌کند.   بنابراین خرد کردن سلول باید خیلی آرام و بدون توان‌های شدید صورت گیرد. برای جلوگیری از تجزیه‌ی سریع سلولی، مجاورت باکتری با لیزوزیم و EDTA در حضور سوکروز صورت می‌گیرد.   در عوض اشکال اسفروپلاست ایجاد می‌شود (دیواره آن‌ها به صورت ناقص تجزيه شده اما غشای سلول باقی می‌ماند). در این صورت تجزیه‌ی سلولی، با اضافه کردن یک پاک کننده غیر یونی مثل تریتون X-100 انجام می‌شود. این روش موجب شکستگی کم کروموزوم شده و با سانتریفیوژ، عصاره‌ی شفافی باقی ‌می‌ماند که تقریبا به طور کامل دارای DNA پلاسمیدی است. کتاب کلون سازی ژن و آنالیز DNA : تی- اِ - براون ویراست هفتم         پارت شانزدهم گردآوری توسط کسری راستی #براون #DNA #انستیتو_سنسوم  #کسری_راستی آیدی کانال: https://t.center/BiologyWithK_R